تقييم السمات الوراثية لخطوط الخلايا البشرية المعالجة بالأدوية باستخدام معلِّمات سمات الحمض النووي الجنائي

يعد توثيق الخط الخلوي باستخدام التكرارات المترادفة القصيرة (STRs) أداة ضرورية لضمان سلامة الخلية خلال عمليات الزراعة المستمرة، بالإضافة للتحقق من عدم وجود خطأ التعرف عليها وحدوث التلوث التداخلي. وتهدف هذه الدراسة إلى التحقق من وجود تغييرات على مستوى النمط الجيني لخلايا MCF-7 وHepG2 التي قد تنتج عن مستخلص الميثانول من أوراق نبتة كف عائشة Anastatica hierochuntica (AH) باستخدام مواقع الـ STR التي تستخدم عادة في الاستعراف. وعولجت خلايا MCF-7 وHepG2 خلال ثلاث فترات زمنية مختلفة بتراكيز متباينة من مستخلص الـAH. وتم استخلاص الحمض النووي من الخلايا الضابطة التي تم معالجتها بمستخلص الميثانول باستخدام أطقم QIAamp® DNA Micro وتقديره الكمي باستخدام أطقم Quantifiler® Duo DNA Quantification ثم تكثيره باعتماد أطقم AmpFlSTR® Identifiler plus PCR Amplification. ولوحظ تباين في تراكيز الحمض النووي لخلايا MCF-7 وHepG2 بين المجموعة الضابطة والمعالجة بـمستخلص الـAH إذ تراوحت بين 300 إلى 2400 µg/ml و150 إلى 2400 µg/ml  خلال فترات المعالجة (24، 48 و72 ساعة) مع فروقات ذات دلالة إحصائية (p<0.05). ولوحظ وجود تغييرات من نوع عدم الاستقرار لـ (MS)، وفقدان الزيجوت غير المتماثل (LOH) بالإضافة إلى عملية الإدخال والحذف في نتائج الـ STR لخلايا MCF-7 وHepG2 المعالجة بتراكيز 1200 و2400 µg/ml خلال الفترات الزمنية 48 و72 ساعة وخلايا HepG2 خلال 24  و48 و72 ساعة من المعالجة. وبالتالي نستنتج أن التراكيز العالية من مستخلصات الAH أثرت على الأنماط الوراثية للخطوط الخلوية، ما أدى إلى خطأ بالاستعراف. ولذلك فإن عملية مصادقة الخط الخلوي بواسطة تقنيات تحليل الحمض النووي الجنائي تؤدي دورًا حاسمًا للخلايا التي تم معالجتها بتراكيز عالية من المركبات الكيميائية. كما أنها تساعد المحقق الجنائي في التدقيق والتأكد من التغييرات المحتملة في الأنماط الوراثية للـ STR للضحية أو المشتبه به الخاضع للعلاج الكيماوي لفترات طويلة.